C8反相液相色譜柱是由具有光學活性的單體，固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相。通過引入手性環境使對映異構體間呈現物理特征的差異，從而達到光學異構體拆分的目的。要實現手性識別，手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。
這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結果。這些相互作用通過影響包埋復合物的形成，特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結果。
由于這種作用力較微弱，因此需要仔細調節、優化流動相和溫度以達到*分離效果。
C8反相液相色譜柱利用各種流動相和添加物可以有很多的應用。一些技術利用添加物可以改變或修飾填料的表面。有時候這些添加物有可能會污染鍵合相表面。
硅膠表面因為有著疏水鍵合相而有一些別的化學性質。殘留的硅烷醇存在于所有的硅膠鍵合填料中。這些硅烷醇具有弱酸性，因此能與某些待分析物合基質成分，特別 是堿性成分。
因為硅烷醇的pKa值大約是4.5，離子化能在中性pH條件下發生因此與陽離子產生靜電相互作用就有可能發生。較老的A型硅膠能容納高濃度金屬離子，而這能使硅膠表面的酸性更大甚至能發生金屬鰲合現象或清除一些化合物。
殘留硅烷醇在非末端封閉的硅膠合短鏈鍵合相如 C2或C4上更讓人煩惱。
